Tet-On- og Tet-Off-ekspressionssystemer: første generation
Hvis du opgraderer dit system eller køber et Tet-system for første gang, anbefaler vi, at du vælger et Tet-On 3G- eller Tet-One-system
Første generation: Tet-On- og Tet-Off-vektorer
Dette er vektorer fra de oprindelige systemer, der blev beskrevet af laboratorierne Hermann Bujard, Manfred Gossen og Wolfgang Hillen, og som blev lanceret af Clontech (nu Takara Bio USA) i 1996. Deres ydeevne er blevet overgået af to efterfølgende generationer.
Den anden generation: Tet-On Advanced- og Tet-Off Advanced-vektorer
I forhold til vektorerne fra de oprindelige Tet-On- og Tet-Off-systemer er vores Tet-Advanced-vektorer blevet optimeret til forbedret ekspression i pattedyrceller ved at udnytte menneskelige kodonpræferencer og fjerne kryptiske splejsesteder fra mRNA-sekvensen af transaktivatoren. Disse forbedringer fører til højere og mere stabile ekspressionsniveauer, mens de tre minimale VP16-transkriptionsaktiveringsdomæner minimerer off-target-effekter og reducerer toksicitet. PTight-promotoren indeholder en modificeret TRE, der både reducerer basal ekspression og fremmer tæt binding til Tet-Advanced transaktivatorproteinerne under induktion for at muliggøre specifik og højniveau transkription af dit nedstrømsgen.
Tredje generation: Tet-On 3G-systemet
Tet-On 3G-systemet er det mest avancerede inducerbare ekspressionssystem til pattedyrceller. Transaktivatoren svarer til Tet-On Advanced-systemet, men yderligere mutationer fører til yderligere følsomhed over for doxycyclin. Desuden reducerer sekvensoptimering inden for PTRE3G-promotoren yderligere den basale ekspression op til 15 gange sammenlignet med andengenerationssystemer. Hvis du vil læse mere om Tet-On 3G-systemet, kan du besøge Tet-On 3G- og Tet-One-siderne.