PMC
La lettera dei signori Stricker e Winger che critica il nostro studio (9) contiene interpretazioni errate e imprecisioni.
In primo luogo, la loro affermazione che i nostri criteri di selezione dei pazienti erano “discutibili” non è corretto. I criteri di selezione dei pazienti erano chiari e ben descritti nel manoscritto. D’altra parte, “La malattia di Lyme cronica” (CLD) è un termine mal definito che comprende i pazienti con sindrome post-Lyme (PLDS), così come i pazienti con altre condizioni (erroneamente diagnosticato come, o erroneamente attribuito a, CLD), con la maggior parte dei pazienti con diagnosi di CLD non avendo alcuna prova della precedente malattia di Lyme (4). In questo contesto, i pazienti con PLDS è la sottopopolazione di pazienti “CLD” che è il meglio definito, richiedendo i pazienti di avere effettivamente avuto una documentabile infezione antecedente con Borrelia burgdorferi. PLDS è stato oggetto degli studi più scientificamente rigorosi (3, 6, 7). Come descritto nel nostro documento, i controlli recuperati avevano avuto prove oggettive della malattia di Lyme e aveva soddisfatto la definizione di caso CDC della malattia di Lyme (1).
Stricker e Winger scrivere che PLDS è un “unvetted entità diagnostica definita da test che è distorto contro le donne,” senza alcuna prova reale per sostenere questo commento piuttosto infiammatorio. Il riferimento citato a sostegno di questa affermazione (12) mostra in realtà che c’è un’equa distribuzione di genere tra i pazienti con diagnosi di PLDS. Inoltre, il riferimento citato da Stricker e Winger (5) per sostenere l’affermazione che i pazienti nel loro studio (10) aveva una distribuzione di genere coerente con CLD non ha alcuna rilevanza per CLD in quanto affronta una questione completamente diversa nella malattia di Lyme (reinfezione). Per quanto riguarda PLDS essere “unvetted,” questa entità è chiaramente meglio definito e studiato di CLD, come discusso sopra.
Stricker e Winger sostengono che il sistema di test citometria di flusso utilizzato nel loro studio (10) ha avuto un “range stabilito normale e ben definito coefficiente di variazione”. Non siamo a conoscenza di alcun dato pubblicato a sostegno di questa affermazione. Il loro studio cita solo un range normale per CD3-/CD57+ ma non fornisce dati di supporto, dato che il loro studio non includeva volontari sani e nessuna misurazione ripetuta dai donatori di controllo. Inoltre, non siamo a conoscenza di alcuna letteratura pubblicata che fornisca tali dati specificamente sul conteggio delle cellule CD3-/CD57+, poiché questa misurazione non è utilizzata in nessun altro contesto medico. Non siamo a conoscenza di un laboratorio di citometria a flusso che esegua questo test di routine (al di fuori dei laboratori che offrono questo test ai medici che lo utilizzano per la CLD). Inoltre, come discusso nel nostro studio, la misurazione delle cellule CD3-/CD57+ non è un approccio standard della citometria a flusso per la misurazione delle cellule natural killer (NK); piuttosto, l’approccio di routine per la quantificazione delle NK utilizza una combinazione di espressione superficiale CD56 e CD16 insieme alla colorazione negativa per CD3 (per escludere le cellule T che esprimono i marcatori NK). Pertanto, ai fini del nostro studio, i volontari sani sono serviti come fonte di campioni per stabilire l’intervallo di riferimento.
Stricker e Winger criticano il fatto che non abbiamo correlato i conteggi CD3-/CD57+ con i sintomi dei pazienti, ma nel loro studio la diminuzione è stata riportata in tutti i pazienti non sottoposti a terapia antibiotica. Nessuno dei nostri pazienti stava ricevendo una terapia antibiotica.
Mentre Stricker e Winger hanno ragione che il nostro studio non ha il potere di guardare le piccole differenze tra i numeri medi di cellule dei diversi gruppi, la completa sovrapposizione tra i range di valori dei pazienti e dei volontari sani indica che questo test non è utile per valutare o monitorare i gruppi di pazienti che abbiamo studiato. Per questo motivo, non ha senso eseguire campioni seriali o correlazioni con i sintomi dei pazienti.
Inoltre, abbiamo appena completato un’analisi di un gruppo allargato di volontari sani composto da 40 soggetti. In questa valutazione dei controlli, i valori assoluti delle cellule CD3-/CD57+ variavano da 30 a 730 cellule/mm3. Questi risultati sono mostrati in Fig. Fig.1,1, insieme ai valori dei pazienti PLDS, dei pazienti guariti e del gruppo di volontari sani precedentemente forniti nel nostro articolo. Abbiamo anche scoperto che c’era una variazione considerevole nel numero di cellule CD3- CD57+ nel tempo sulla base di test effettuati su cinque volontari sani due volte, in un intervallo da 5 a 12 settimane. Questi dati hanno dimostrato che CD3- CD57 + conta cambiato nei controlli nel corso dell’intervallo di tempo e che questo variava da una diminuzione di 124 cellule / mm3 ad un aumento di 24 cellule / mm3.
CD3- CD57 + numeri delle cellule in pazienti PLDS, individui che hanno recuperato dalla malattia di Lyme (REC), e volontari sani (HV), precedentemente pubblicato, e un nuovo gruppo di 40 volontari sani (HV New).
Un altro punto, solo brevemente accennato nel nostro documento, è che la pretesa diminuzione delle cellule CD57 + in pazienti pensati per essere affetti da un’infezione cronica è in contrasto con ciò che è stato precedentemente riportato per quanto riguarda CD57. Si pensa che l’espressione di CD57 sia un marcatore di cellule differenziate terminalmente (2), e l’espansione delle cellule CD57+ è stata associata alla stimolazione cronica dell’antigene e all’attivazione del sistema immunitario (8, 11).