Systemy ekspresji Tet-On i Tet-Off: pierwsza generacja
Jeśli modernizujesz swój system lub kupujesz system Tet po raz pierwszy, zalecamy wybór systemu Tet-On 3G lub Tet-One
Pierwsza generacja: Wektory Tet-On i Tet-Off
Są to wektory pochodzące z oryginalnych systemów opisanych przez laboratoria Hermanna Bujarda, Manfreda Gossena i Wolfganga Hillena i wprowadzone na rynek przez Clontech (obecnie Takara Bio USA) w 1996 roku. Ich wydajność została przewyższona przez dwie kolejne generacje.
Druga generacja: Wektory Tet-On Advanced i Tet-Off Advanced
W porównaniu do wektorów z oryginalnych systemów Tet-On i Tet-Off, nasze wektory Tet-Advanced zostały zoptymalizowane pod kątem lepszej ekspresji w komórkach ssaków poprzez wykorzystanie ludzkich preferencji kodonów i usunięcie kryptycznych miejsc splice z sekwencji mRNA transaktywatora. Te ulepszenia prowadzą do wyższych i bardziej stabilnych poziomów ekspresji, podczas gdy trzy minimalne domeny aktywacji transkrypcji VP16 minimalizują efekty poza celem i zmniejszają toksyczność. Promotor PTight zawiera zmodyfikowane TRE, które zarówno redukuje ekspresję podstawową, jak i promuje ścisłe wiązanie z białkami transaktywatora Tet-Advanced podczas indukcji, aby umożliwić specyficzną i wysokopoziomową transkrypcję Twojego genu downstream.
Trzecia generacja: System Tet-On 3G
System Tet-On 3G jest najbardziej zaawansowanym systemem indukowalnej ekspresji dla komórek ssaków. Transaktywator jest podobny do systemu Tet-On Advanced, ale dodatkowe mutacje prowadzą do dalszej wrażliwości na doksycyklinę. Co więcej, optymalizacja sekwencji w obrębie promotora PTRE3G dodatkowo zmniejsza ekspresję podstawową nawet 15-krotnie w porównaniu z systemami drugiej generacji. Aby dowiedzieć się więcej o systemie Tet-On 3G, odwiedź strony Tet-On 3G i Tet-One.