PMC
Dr. Stricker e a carta de Winger criticando nosso estudo (9) contém interpretações erradas e imprecisões.
Primeiro, a alegação deles de que nossos critérios de seleção de pacientes eram “questionáveis” não é correta. Os critérios de seleção dos pacientes foram claros e bem descritos no manuscrito. Por outro lado, “doença de Lyme crônica” (DCL) é um termo mal definido que inclui pacientes com síndrome pós-Lyme (SDLP), bem como pacientes com outras condições (diagnosticadas ou atribuídas erroneamente à DCL), sendo que a maioria dos pacientes diagnosticados com DCL não tem evidência prévia de doença de Lyme (4). Neste contexto, os pacientes com DPP é a subpopulação de pacientes com DTC que é a mais bem definida, exigindo que os pacientes tenham realmente tido uma infecção antecedente documentável com Borrelia burgdorferi. A PLDS tem sido objecto dos estudos mais rigorosos cientificamente (3, 6, 7). Como descrito em nosso trabalho, os controles recuperados tinham tido evidências objetivas da doença de Lyme e tinham cumprido a definição de caso de doença de Lyme do CDC (1).
Stricker e Winger escrevem que o PLDS é uma “entidade de diagnóstico não definida por testes tendenciosos contra as mulheres”, sem nenhuma evidência real que apóie este comentário bastante inflamatório. A referência citada para apoiar esta afirmação (12) mostra, na verdade, que existe uma distribuição igual entre os pacientes diagnosticados com PLDS. Além disso, a referência citada por Stricker e Winger (5) para apoiar a alegação de que os pacientes em seu estudo (10) tinham uma distribuição de gênero consistente com a DTC não tem qualquer relevância para a DTC, uma vez que ela aborda uma questão completamente diferente na doença de Lyme (reinfecção). Quanto ao PLDS ser “não redefinido”, essa entidade é claramente melhor definida e estudada do que a DTC, como discutido acima.
Stricker e Winger afirmam que o sistema de teste de citometria de fluxo utilizado em seu estudo (10) tinha uma “faixa normal estabelecida e coeficiente de variação bem definido”. Não temos conhecimento de quaisquer dados publicados para apoiar esta alegação. O estudo deles apenas cita uma faixa normal para CD3-/CD57+, mas não fornece dados de apoio, pois o estudo deles não incluiu voluntários saudáveis e nenhuma medida repetida dos doadores de controle. Além disso, não temos conhecimento de nenhuma literatura publicada que forneça tais dados especificamente sobre a contagem de células CD3-/CD57+, já que esta medida não é utilizada em nenhum outro contexto médico. Não temos conhecimento de um laboratório de citometria de fluxo que realiza este ensaio rotineiramente (fora dos laboratórios que oferecem este ensaio aos profissionais que o utilizam para a CLD). Além disso, como discutido em nosso estudo, a medição de células CD3-/CD57+ não é uma abordagem de citometria de fluxo padrão para a medição de células naturais assassinas (NK); ao contrário, a abordagem de rotina para a quantificação NK utiliza uma combinação de expressão de superfície CD56 e CD16 juntamente com coloração negativa para CD3 (para excluir células T que expressam marcadores NK). Portanto, para os propósitos de nosso estudo, voluntários saudáveis serviram como fonte da amostra para estabelecer a faixa de referência.
Stricker e Winger criticam que não correlacionamos a contagem de CD3-/CD57+ com os sintomas dos pacientes, mas em seu estudo foi relatado que a diminuição ocorreu em todos os pacientes que não receberam antibioticoterapia. Nenhum dos nossos pacientes estava recebendo antibioticoterapia.
Embora Stricker e Winger estejam certos de que nosso estudo não tem o poder de olhar pequenas diferenças entre os números médios de células dos diferentes grupos, a sobreposição completa entre as faixas de valores dos pacientes e voluntários saudáveis indica que este teste não é útil para avaliar ou monitorar os grupos de pacientes que estudamos. Por este motivo, não faz sentido realizar amostras em série ou correlações com sintomas de pacientes.
Outras vezes, acabamos de completar uma análise de um grupo expandido de voluntários saudáveis composto por 40 sujeitos. Nesta avaliação de controles, os valores absolutos para as células CD3-/CD57+ variaram de 30 a 730 células/mm3. Estes resultados são mostrados na Fig. 1,1, juntamente com os valores de pacientes com PLDS, pacientes recuperados e o grupo de voluntários saudáveis fornecidos anteriormente no nosso trabalho. Verificamos também que houve uma variação considerável no número de células CD3- CD57+ ao longo do tempo, com base no teste de cinco voluntários saudáveis duas vezes, dentro de um intervalo de 5 a 12 semanas. Esses dados demonstraram que a contagem de CD3- CD57+ mudou nos controles no intervalo de tempo e que isso variou de uma diminuição de 124 células/mm3 para um aumento de 24 células/mm3.
CD3- CD57+ em pacientes com PLDS, indivíduos que se recuperaram da doença de Lyme (REC) e voluntários saudáveis (HV), previamente publicados, e um novo grupo de 40 voluntários saudáveis (HV New).
Outro ponto, apenas brevemente aludido em nosso trabalho, é que a alegada diminuição de células CD57+ em pacientes que se pensa sofrer de uma infecção crônica está em desacordo com o que foi relatado anteriormente em relação ao CD57. A expressão CD57 é considerada como um marcador de células terminalmente diferenciadas (2), e a expansão das células CD57+ tem sido associada à estimulação crônica de antígenos e ativação do sistema imunológico (8, 11).