Tet-On en Tet-Off-expressiesystemen: eerste generatie
Als u uw systeem wilt upgraden of voor de eerste keer een Tet-systeem aanschaft, raden wij u aan te kiezen voor een Tet-On 3G- of Tet-One-systeem
Eerste generatie: Tet-On en Tet-Off vectoren
Dit zijn vectoren van de oorspronkelijke systemen beschreven door de laboratoria van Hermann Bujard, Manfred Gossen, en Wolfgang Hillen, en gelanceerd door Clontech (nu Takara Bio USA) in 1996. Hun prestaties werden overtroffen door twee latere generaties.
Tweede generatie: Tet-On Advanced en Tet-Off Advanced vectoren
Vergeleken met de vectoren van de oorspronkelijke Tet-On en Tet-Off systemen, zijn onze Tet-Advanced vectoren geoptimaliseerd voor verbeterde expressie in zoogdiercellen door gebruik te maken van menselijke codonvoorkeuren en het verwijderen van cryptische splice sites uit de mRNA-sequentie van de transactivator. Deze verbeteringen leiden tot hogere en stabielere expressieniveaus, terwijl de drie minimale VP16-transcriptieactiveringsdomeinen off-target-effecten tot een minimum beperken en de toxiciteit verminderen. De PTight-promotor bevat een gemodificeerde TRE die zowel de basale expressie vermindert als een hechte binding met de Tet-Advanced-transactivatoreiwitten tijdens inductie bevordert om specifieke transcriptie op hoog niveau van uw downstream-gen mogelijk te maken.
Derde generatie: Tet-On 3G systeem
Het Tet-On 3G systeem is het meest geavanceerde induceerbare expressiesysteem voor zoogdiercellen. De transactivator is vergelijkbaar met het Tet-On Advanced systeem, maar bijkomende mutaties leiden tot een grotere gevoeligheid voor doxycycline. Bovendien zorgt de optimalisering van de sequentie binnen de PTRE3G-promotor voor een tot 15-voudige verlaging van de basale expressie in vergelijking met de tweede-generatiesystemen. Om meer te lezen over het Tet-On 3G systeem, bezoek de Tet-On 3G en Tet-One pagina’s.