Pereddikesyre
1 Liquid Chemical
Peroxyeddikesyre, eller pereddikesyre, var det første bakteriedræbende middel, der blev brugt til at sterilisere isolatorer, og det bruges stadig på grund af dets effektivitet, lave pris og kompatibilitet med de fleste plasttyper. Den er effektiv ved lave koncentrationer og temperaturer og, i flydende form, i tilstedeværelse af organisk materiale, selv om den ikke trænger ind i parasitcyster og leddyræg (van der Gulden og van Erp, 1972). Det kan fås hos leverandører af laboratoriekemikalier som en væske, der indeholder 40% pereddikesyre. En stor fordel ved pereddikesyre er, at den er effektiv i damp- og væskefasen (Block, 2001; Trexler, 1984). Dampen, der dannes, når en 1-2% opløsning sprøjtes ved stuetemperatur, inaktiverer de mest resistente bakterier og skimmelsporer inden for 15 minutter, og direkte anvendelse af væsken opnår den samme virkning inden for 1 minut (Trexler, 1984). Pereddikesyre anvendes undertiden i en koncentration på 4 %, men der er ingen beviser fra faktiske gnotobiotiske anvendelser for, at dette er mere effektivt end 1 % (R. Orcutt, personlig kommunikation, marts 2014). Optimal sporicid aktivitet i dampfasen opnås ved 80 % relativ luftfugtighed. Pereddikesyreopløsning skal altid tilberedes umiddelbart før brug, da den mister omkring halvdelen af sin styrke inden for 24 timer. 30 minutters kontakttid er tilstrækkelig. Pereddikesyre er ætsende, og den er irriterende for øjne, hud og åndedrætsveje. Personale, der anvender pereddikesyre, bør bære handsker, engangsbeklædning og en helmaske med kemisk filterpatron. Pereddikesyre betragtes ikke som kræftfremkaldende af Environmental Protection Agency, Occupational Safety and Health Administration eller National Toxicology Program, og den er ikke genotoksisk eller mutagen (Malchesky, 2001), selv om den kan være tumorfremkaldende.
Kombination af pereddikesyre med hydrogenperoxid resulterer i synergistisk antimikrobiel aktivitet (Block, 2001). Spor-Klenz™ (Steris Life Sciences), en klar til brug sterilisationsopløsning, der indeholder 1% hydrogenperoxid og 0,08% pereddikesyre, har en bred sporicid virkning og inaktiverer Mycobacterium spp. fuldstændigt efter 20 minutters kontakttid ved 20°C (Rutala et al., 1991). Det er blevet et anerkendt steriliseringsmiddel for gnotobiotika. En kontakttid på 1 time anbefales. Der findes andre produkter, der kombinerer pereddikesyre og hydrogenperoxid, jf. nedenfor.
Khlordioxid i flydende form er nu det mest almindeligt anvendte steriliseringsmiddel til gnotobiotika. Det er meget effektivt mod alle mikroorganismer og er ligesom pereddikesyre effektivt i både gas- og væskeform (Jeng og Woodworth, 1990; Knapp og Battisti, 2001; Orcutt et al., 1981; Pell-Walpole og Waller, 1984). Det er 1075 gange mere sporicid i gasform end ethylenoxid (Jeng og Woodworth, 1990). Blandt de flydende klordioxidsteriliseringsmidler kan nævnes Exspor™ (Ecolab Inc.) og Clidox-S™ (Pharmacal Research Laboratories). Disse består af to dele, en baseopløsning af natriumchlorit og en sur aktivator, som kombineres og blandes med vand umiddelbart før anvendelse for at danne en opløsning af klorholdig syre og klordioxid. Der anbefales en kontakttid på mindst 30 minutter. Sådanne produkter kan ætse rustfrit stål.
Steriplex™ SD (sBioMed) er et todelt produkt, der anvender sølv, pereddikesyre og ethanol (henholdsvis 0,015 %, 0,15 % og 10 % i det aktiverede produkt). Det sælges som et desinfektionsmiddel, ikke et steriliseringsmiddel, til hospitaler og andre anvendelser. Producenten angiver imidlertid, at det er sporicid, baktericid, fungicid og viricid; at det hurtigt inaktiverer Clostridium difficile og Bacillus subtilis-sporer; at det ikke irriterer; og at det har en holdbarhed på 60 dage efter aktivering (Robison, 2012; sBioMed, 2013a, b, c). Steriplex™ SD er begyndt at blive vedtaget til gnotobiotisk brug (C. Bell, personlig kommunikation, januar 2014). I vores forsøg dræbte Steriplex™ SD Geobacillus stearothermophilus 106 sporestrimler på 10 min og Bacillus atropheus 106 strimler på 30 min.
Andre flydende steriliserende og “højniveau”-desinfektionsmidler omfatter Actril™ (0.08 % pereddikesyre og 1,0 % hydrogenperoxid; Mar Cor Purification), Cidexplus™ 28-dages opløsning (3,4 % glutaraldehyd; Johnson & Johnson), Minncare™ (4,5 % pereddikesyre og 22.0% hydrogenperoxid; Minntech BV), PeridoxRTU™ (4,0-4,8% hydrogenperoxid og 0,17-0,29% pereddikesyre; Contec Inc.), Vimoba™ (klordioxid; Quip Laboratories), Sanosil S010™ (5% hydrogenperoxid og 0.01% sølvnitrat; Sanosil International), Sporgon™ (7,35% hydrogenperoxid og 0,23% PAA; Decon Laboratories) og Wavicide-01™ (2,65% glutaraldehyd; Medical Chemical Corporation). Vi er ikke bekendt med rapporter om evaluering af nogen af disse produkter til brug i gnotobiotika.
Der findes en stor mængde litteratur om afprøvning af flydende sterilisations- og desinfektionsmidler i sundhedspleje og fødevareforarbejdning; desværre er der dog kun få oplysninger om sammenlignende effektivitet eller standardiseret afprøvning, som anvendes direkte på gnotobiotika. Brugerne bør være opmærksomme på, at resultaterne af standardiserede testmetoder kan variere betydeligt. Organismer på overflader er næsten altid vanskeligere at dræbe end dem i suspension (Berube et al., 2001; Gibson et al., 1995; Sagripanti og Bonifacino, 1999, 2000; Springthorpe og Sattar, 2005; van Klingeren et al., 1998), og i overfladetests kan forskellige materialer give forskellige resultater (Thorn et al., 2013). Desuden viser resultaterne af standardiserede test ikke nødvendigvis effektiviteten i det miljø, hvor steriliseringsmidler og procedurer rent faktisk vil blive anvendt (Gibson et al., 1995; R. Orcutt, personlig kommunikation, marts 2014). Efter vores mening er det af langt mindre værdi at anvende standardiserede laboratorietests til at sammenligne produkter, der er veletableret som effektive steriliseringsmidler, når de anvendes korrekt, end at fastslå, at et steriliseringsmidlets anvendelser – dvs. de procedurer, hvor det anvendes – er effektive og pålidelige. De metoder, vi anvender, er beskrevet de relevante steder i dette kapitel. En sidste anbefaling er, at selv om man vælger at verificere væskesterilisation, er det vigtigt at fastslå, at sterilisationen er reel og ikke blot tilsyneladende som følge af væksthæmning. Dette kan gøres ved hjælp af fortyndingsteknikker, neutraliserende medier eller kombinationer af disse. Dey-Engley-neutraliserende bouillon fungerer godt med klordioxid- og pereddikesyresteriliseringsmidler (Espigares et al., 2003; Sutton et al., 2002; Terleckyj og Axler, 1987). I vores hænder neutraliserede det dog ikke Steriplex SD™.
Gnotobiotiske anlægs personale rådes til at samarbejde med deres institutionelle miljøhygiejne- og sikkerhedspersonale vedrørende brugen af aerosoliserede steriliseringsmidler. Der bør foretages en vurdering af arbejdsrisikoen for at implementere brugen af passende personlige værnemidler (kemisk åndedrætsværn, handsker, beskyttelsesbriller, ansigtsskærm osv.) og tekniske kontrolforanstaltninger som f.eks. udsugningsluft for at fjerne kemiske dampe fra personalet.