Tet-On und Tet-Off Expressionssysteme: erste Generation
Wenn Sie Ihr System aufrüsten oder zum ersten Mal ein Tet-System kaufen, empfehlen wir Ihnen ein Tet-On 3G oder Tet-One System
Erste Generation: Tet-On- und Tet-Off-Vektoren
Dies sind Vektoren aus den ursprünglichen Systemen, die von den Labors von Hermann Bujard, Manfred Gossen und Wolfgang Hillen beschrieben und von Clontech (jetzt Takara Bio USA) 1996 auf den Markt gebracht wurden. Ihre Leistung wurde von zwei nachfolgenden Generationen übertroffen.
Zweite Generation: Tet-On Advanced- und Tet-Off Advanced-Vektoren
Im Vergleich zu den Vektoren der ursprünglichen Tet-On- und Tet-Off-Systeme wurden unsere Tet-Advanced-Vektoren für eine verbesserte Expression in Säugetierzellen optimiert, indem menschliche Codonpräferenzen genutzt und kryptische Spleißstellen aus der mRNA-Sequenz des Transaktivators entfernt wurden. Diese Verbesserungen führen zu höheren und stabileren Expressionsniveaus, während die drei minimalen VP16-Transkriptionsaktivierungsdomänen Off-Target-Effekte minimieren und die Toxizität verringern. Der PTight-Promotor enthält einen modifizierten TRE, der sowohl die Basalexpression reduziert als auch die enge Bindung an die Tet-Advanced-Transaktivatorproteine während der Induktion fördert, um eine spezifische und hochgradige Transkription Ihres Downstream-Gens zu ermöglichen.
Dritte Generation: Tet-On 3G System
Das Tet-On 3G System ist das am weitesten entwickelte induzierbare Expressionssystem für Säugetierzellen. Der Transaktivator ist ähnlich wie beim Tet-On Advanced System, aber zusätzliche Mutationen führen zu einer höheren Empfindlichkeit gegenüber Doxycyclin. Darüber hinaus wird durch eine Sequenzoptimierung innerhalb des PTRE3G-Promotors die Basalexpression im Vergleich zu Systemen der zweiten Generation um das bis zu 15-fache reduziert. Weitere Informationen über das Tet-On 3G-System finden Sie auf den Seiten Tet-On 3G und Tet-One.