Sistemi di espressione Tet-On e Tet-Off: prima generazione
Se state aggiornando il vostro sistema o acquistando un sistema Tet per la prima volta, vi consigliamo di scegliere un sistema Tet-On 3G o Tet-One
Prima generazione: Vettori Tet-On e Tet-Off
Sono vettori dei sistemi originali descritti dai laboratori di Hermann Bujard, Manfred Gossen e Wolfgang Hillen e lanciati da Clontech (ora Takara Bio USA) nel 1996. Le loro prestazioni sono state superate da due generazioni successive.
Seconda generazione: Vettori Tet-On Advanced e Tet-Off Advanced
Rispetto ai vettori dei sistemi Tet-On e Tet-Off originali, i nostri vettori Tet-Advanced sono stati ottimizzati per una migliore espressione nelle cellule di mammifero utilizzando le preferenze dei codoni umani e rimuovendo i siti criptici di splice dalla sequenza di mRNA del transattivatore. Questi miglioramenti portano a livelli di espressione più alti e più stabili, mentre i tre domini minimi di attivazione della trascrizione VP16 minimizzano gli effetti off-target e riducono la tossicità. Il promotore PTight contiene un TRE modificato che riduce l’espressione basale e promuove uno stretto legame con le proteine transattivatrici Tet-Advanced durante l’induzione per permettere una trascrizione specifica e di alto livello del tuo gene a valle.
Terza generazione: Sistema Tet-On 3G
Il sistema Tet-On 3G è il sistema di espressione inducibile più avanzato per le cellule di mammifero. Il transattivatore è simile al sistema Tet-On Advanced, ma mutazioni aggiuntive portano ad una maggiore sensibilità alla doxiciclina. Inoltre, l’ottimizzazione della sequenza all’interno del promotore PTRE3G riduce ulteriormente l’espressione basale fino a 15 volte rispetto ai sistemi di seconda generazione. Per saperne di più sul sistema Tet-On 3G, visita le pagine Tet-On 3G e Tet-One.