Sistemas de expressão Tet-On e Tet-Off: primeira geração
Se estiver a actualizar o seu sistema ou a adquirir um sistema Tet pela primeira vez, recomendamos que escolha um sistema Tet-On 3G ou Tet-One
Primeira geração: Vectores Tet-On e Tet-Off
Estes são vectores dos sistemas originais descritos pelos laboratórios de Hermann Bujard, Manfred Gossen e Wolfgang Hillen, e lançados pela Clontech (agora Takara Bio USA) em 1996. O seu desempenho foi ultrapassado por duas gerações posteriores.
Geração de segundos: Tet-On Advanced e Tet-Off Advanced vectores
Comparado com os vectores dos sistemas Tet-On e Tet-Off originais, os nossos vectores Tet-Advanced foram optimizados para uma melhor expressão em células de mamíferos, utilizando as preferências de códão humano e removendo sítios de emenda críptica da sequência mRNA do transactivador. Essas melhorias levam a níveis de expressão mais altos e mais estáveis, enquanto os três domínios mínimos de ativação de transcrição VP16 minimizam os efeitos fora do alvo e reduzem a toxicidade. O promotor PTight contém um TRE modificado que reduz a expressão basal e promove uma ligação estreita às proteínas Tet-Advanced transactivator durante a indução para permitir uma transcrição específica e de alto nível do seu gene a jusante.
Terceira geração: Tet-On 3G system
O Tet-On 3G system é o mais avançado sistema de expressão induzível para células de mamíferos. O transativador é similar ao sistema Tet-On Advanced, mas mutações adicionais levam a uma maior sensibilidade à doxiciclina. Além disso, a otimização da sequência dentro do promotor PTRE3G reduz ainda mais a expressão basal até 15 vezes em comparação com os sistemas de segunda geração. Para ler mais sobre o sistema Tet-On 3G, por favor visite as páginas Tet-On 3G e Tet-One.