Systèmes d’expression Tet-On et Tet-Off : première génération
Si vous mettez à niveau votre système ou si vous achetez un système Tet pour la première fois, nous vous recommandons de choisir un système Tet-On 3G ou Tet-One
Première génération : Vecteurs Tet-On et Tet-Off
Ce sont des vecteurs issus des systèmes originaux décrits par les laboratoires de Hermann Bujard, Manfred Gossen et Wolfgang Hillen, et lancés par Clontech (aujourd’hui Takara Bio USA) en 1996. Leurs performances ont été dépassées par deux générations ultérieures.
Seconde génération : Vecteurs Tet-On Advanced et Tet-Off Advanced
Par rapport aux vecteurs des systèmes Tet-On et Tet-Off originaux, nos vecteurs Tet-Advanced ont été optimisés pour une meilleure expression dans les cellules de mammifères en utilisant les préférences de codons humains et en supprimant les sites d’épissage cryptiques de la séquence d’ARNm du transactivateur. Ces améliorations conduisent à des niveaux d’expression plus élevés et plus stables, tandis que les trois domaines d’activation de la transcription VP16 minimisent les effets hors cible et réduisent la toxicité. Le promoteur PTight contient un TRE modifié qui réduit à la fois l’expression basale et favorise une liaison étroite avec les protéines transactivatrices Tet-Advanced pendant l’induction pour permettre une transcription spécifique et de haut niveau de votre gène en aval.
Troisième génération : Système Tet-On 3G
Le système Tet-On 3G est le système d’expression inductible le plus avancé pour les cellules de mammifères. Le transactivateur est similaire au système Tet-On Advanced, mais des mutations supplémentaires entraînent une sensibilité accrue à la doxycycline. De plus, l’optimisation de la séquence dans le promoteur PTRE3G réduit encore l’expression basale jusqu’à 15 fois par rapport aux systèmes de deuxième génération. Pour en savoir plus sur le système Tet-On 3G, veuillez consulter les pages Tet-On 3G et Tet-One.